1. 基本特性?

• ?分子量?：35-36 kDa（重組人源Annexin V）

• ?標(biāo)記物?：FITC（異硫氰酸熒光素），激發(fā)波長494 nm，發(fā)射波長516-518 nm（綠色熒光）

• ?保存條件?：-20℃避光保存，避免反復(fù)凍融

?2. 作用機(jī)制?

• ?靶標(biāo)結(jié)合?：

• Annexin V是鈣離子依賴性磷脂結(jié)合蛋白，特異性識別凋亡早期細(xì)胞膜外翻的磷脂酰絲氨酸（PS）?12。

• 健康細(xì)胞中PS位于膜內(nèi)側(cè)，凋亡時通過caspase激活的刮板酶（scramblase）翻轉(zhuǎn)至外側(cè)?13。

• ?檢測原理?：

• FITC標(biāo)記后保留PS結(jié)合能力，通過熒光信號區(qū)分凋亡細(xì)胞（綠色熒光）與正常/壞死細(xì)胞（需結(jié)合PI/7-AAD）?

?3. 應(yīng)用場景?

• ?流式細(xì)胞術(shù)?：定量凋亡細(xì)胞比例（如藥物篩選、腫瘤研究）?24。

• ?熒光顯微鏡?：直接觀察組織或細(xì)胞中的凋亡信號?35。

• ?多重檢測?：可與其他熒光探針（如線粒體膜電位染料）聯(lián)用?

4. 實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng)?

• ?鈣離子依賴?：需含Ca2?的緩沖液（如1× Binding Buffer）?14。

• ?避光操作?：FITC易光解，孵育和檢測需避光?25。

• ?區(qū)分凋亡階段?：

• ?早期凋亡?：Annexin V+/PI-

• ?晚期凋亡/壞死?：Annexin V+/PI+?

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